苏州赛分科技股份有限公司[胰岛素,疫苗,抗体,mRNA,重组蛋白,体积排阻色谱柱,离子交换色谱柱,亲和色谱柱,疏水作用色谱柱,疏水反相色谱柱,C18反相色谱柱]
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开发小粒径填料的优势在于能实现更高的分离效率和分辨率。当粒径从5 μm降至3 μm时，柱效几乎为原先的两倍。如图1和表1所示：当填料粒径从5 μm降至3 μm时，BSA二聚体、BSA、核糖核酸酶A的塔板数分别从2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。图2和表2进一步表明3 μm Zenix柱在分离各种蛋白时能实现更高的分离效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm长的Zenix柱时能够达到40,000的塔板数。
图1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分离蛋白混合物A
色谱柱：Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流动相：150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速：7.8x300 mm为1.0 mL/min; 4.6x300 mm为0.35 mL/min
温度：室温（~23℃）
检测器：UV 214 nm
进样量：10 μL （4.6x300 mm为3 μL）
样品： 1） 甲状腺球蛋白（1.0 mg/mL）, 670 kD; 2） BSA二聚体, 132 kD; 3） BSA （1.0 mg/mL）, 66 kD; 4） 核糖核酸酶A （1.0 mg/mL）, 13.7 kD; 5） 尿嘧啶（2.5 μg/mL）, 120 D
表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率
峰
蛋白
Zenix 300 （4.6x300）
Zenix 300（7.8x300）
SRT 300（7.8x300）
1
甲状腺球蛋白
2180
1730
1120
2
BSA二聚体
4390
4600
2720
3
BSA
10280
13090
6590
4
核糖核酸酶A
16490
22000
11160
5
尿嘧啶
33640
38500
27860
图2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率 （内径为7.8 mm）
色谱柱：Zenix SEC （7.8x300 mm, 3 µm）
流动相：150 mM PBS, pH 7.0
流速：1.0 mL/min
反压：Zenix SEC-300为1,375 psi, Zenix SEC-150为1,100psi
温度：室温（~ 23℃）
检测波长：214 nm
进样量：10 μL
样品：1）甲状腺球蛋白 （1.0 mg/L）, 670 kD; 2）BSA二聚体, 132 kD; 3） BSA （1.0 mg/L）, 66 kD; 4）核糖核A （1.0 mg/L）, 13.7 kD; 5） 尿嘧啶 （2.5 μg/mL）, 120 D
表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率
峰
蛋白
Zenix 150
Zenix 300
1
甲状腺球蛋白
18050
2460
2
BSA二聚体
2420
5110
3
BSA
5620
13090
4
核糖核酸酶A
17600
22000
5
尿嘧啶
42000
38500